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妇产科学论文_囊胚期玻璃化二次冷冻对小鼠胚胎
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摘要:文章摘要:背景:在辅助生殖工作中,玻璃化二次冷冻可以有效提高胚胎利用率。课题组前期研究结果显示,不同发育时期的玻璃化二次冷冻显著影响胚胎发育,但其机制尚不明确。目的
文章摘要:背景:在辅助生殖工作中,玻璃化二次冷冻可以有效提高胚胎利用率。课题组前期研究结果显示,不同发育时期的玻璃化二次冷冻显著影响胚胎发育,但其机制尚不明确。目的:探讨不同时期玻璃化二次冷冻影响胚胎发育潜力的可能机制。方法:收集ICR小鼠体内受精的2-细胞胚胎并进行体外培养,随机分为4组:对照组、8-细胞冷冻一次组(8C)、8-细胞冷冻一次解冻后于8-细胞期(8C-8C)或培养至囊胚期(8C-BL)再次冷冻。利用免疫荧光分析囊胚期H3K4me3、H3K9me2及H3K9AC的表达水平;实时荧光定量PCR分析多能性基因Cdx2、Oct4及Sox2的转录水平。结果与结论:(1)免疫荧光结果显示,一次和二次冷冻均会导致囊胚期H3K9me2 (P <0.01)及H3K9AC水平显著上升(P <0.000 1);(2)一次冷冻不影响H3K4me3水平,但二次冷冻组H3K4me3水平显著下降,且在8C-BL组下降尤为严重(P <0.000 1);(3)实时荧光定量PCR结果显示,一次冷冻及8-细胞期二次冷冻不会影响胚胎多能性基因Cdx2、Oct4和Sox2的表达水平,但8C-BL组胚胎多能性基因表达水平显著改变,Oct4的表达水平显著下降(P <0.01),而Cdx2 (P <0.001)和Sox2 (P <0.01)的表达水平显著上升;(4)结果表明,玻璃化二次冷冻对小鼠胚胎的表观遗传具有一定的负面影响,且囊胚期二次冷冻显著影响H3K4me3修饰及多能性相关基因表达水平。
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项目基金:《云南化工》 网址: http://www.ynhgbjb.cn/qikandaodu/2022/0121/2074.html